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技術(shù)文章

如何制作生物顯微鏡下的標(biāo)本?

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一、制作標(biāo)本的條件是什么?


1、載玻片

厚度應(yīng)在0.8~1.2mm,光吸收多,不能使激發(fā)光在標(biāo)本上聚集;載玻片必須光潔,厚度均勻,無(wú)明顯自發(fā)熒光。



2、蓋玻片


厚度在0.17mm左右,光潔。為了加強(qiáng)激發(fā)光,也可用干涉蓋玻片,可以使熒光順利通過(guò),而反射激發(fā)光,這種反射的激發(fā)光女可激發(fā)標(biāo)本。



3、標(biāo)本

組織切片不能太厚,太厚的話激發(fā)光大部分消耗在標(biāo)本下部,而物鏡直接觀察到的上部不充分激發(fā)。



4、封裱劑

常用甘油,無(wú)自發(fā)熒光,無(wú)色透明,熒光的亮度在pH8.5~9.5時(shí)較亮,不易很快褪去。常用甘油混合液作封裱劑。


5、鏡油


用油鏡觀察標(biāo)本時(shí),必須使用鏡油,建議有條件的話使用特制的無(wú)熒光鏡油,也可用上述甘油代替,液體石蠟也可用,只是折光率較低,對(duì)圖像質(zhì)量略有影響。

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二、使用時(shí)需要注意哪些方面


1、按照出廠說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行操作,不要隨意改變。


2、在暗室中進(jìn)行檢查。接上電源,點(diǎn)燃超高壓汞燈5到15分鐘,等光源發(fā)出強(qiáng)光穩(wěn)定后,眼睛適應(yīng)暗室,再開(kāi)始觀察標(biāo)本。


3、防止紫外線對(duì)眼睛的損害,在調(diào)整光源時(shí)應(yīng)戴上防護(hù)眼鏡。


4、檢查時(shí)間每次以1到2小時(shí)左右最佳,超過(guò)90分鐘的話,壓汞燈發(fā)光強(qiáng)度逐漸下降,熒光減弱;熒光也明顯減弱;最多不得超過(guò)3小時(shí)。


5、熒光顯微鏡光源壽命有限,標(biāo)本應(yīng)集中檢查,以節(jié)省時(shí)間,保護(hù)光源。天熱時(shí),應(yīng)加電扇散熱降溫,新?lián)Q燈泡應(yīng)從開(kāi)始就記錄使用時(shí)間。燈熄滅后欲再用時(shí),須待燈泡充分冷卻后才能點(diǎn)燃。



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